Az anatoxint a. Anatoxinok, előállításuk, titrálásuk és gyakorlati alkalmazása

Anatoxinok (tagadásból, toxoméregből) - bakteriális exotoxinokból nyert készítmények, amelyek teljesen mentesek a toxikus tulajdonságoktól, de megtartják az antigén és immunogén tulajdonságokat. A toxoid megszerzésének módszerét 1923-ban Ramon francia tudós javasolta.

Toxoidok készítéséhez az exotoxinokat termelő baktériumkultúrákat folyékony tápközegben növesztik a méreg felhalmozására, majd bakteriális szűrőkön szűrik át a mikrobatestek eltávolítására. A szűrlethez 0,3-0,4%-os formalinoldatot adunk, és 3-4 hétig termosztátba helyezzük 37-40 °C hőmérsékleten, amíg a toxikus tulajdonságok teljesen eltűnnek. A kapott toxoid sterilitását, ártalmatlanságát és immunogenitását vizsgálják.

Az ilyen gyógyszereket nevezik natív toxoidok mert tartalmaznak nagyszámú a tápközeg anyagai, amelyek ballasztok és hozzájárulhatnak a szervezet nemkívánatos reakcióinak kialakulásához a gyógyszer beadásakor. Ezért jelenleg elsősorban tisztított toxoidokat használnak, amelyekhez a natív toxoidokat különböző fizikai, ill. kémiai módszerek(ioncserélő kromatográfia, savas kicsapás stb.), hogy minden ballasztanyagtól megszabaduljunk, és a gyógyszert kisebb térfogatban koncentráljuk. A toxoid részecskeméretének csökkenése azonban szükségessé tette, hogy a hatóanyagot adjuvánsokon adszorbeálják. Így az alkalmazott toxoidok adszorbeált, nagy tisztaságú koncentrált készítmények. A toxoid fajlagos aktivitását a flokkulációs reakcióban, úgynevezett flokkulációs egységekben, vagy a toxoid kötési reakcióban határozzuk meg, kötési egységekben (EC) kifejezve.

Toxoidok titrálása a flokkulációs reakcióban (Ramon-módszer szerint) a standard flokkuláló antitoxikus szérum szerint állítják elő, amelyben ismert az 1 ml-ben lévő Nemzetközi Antitoxikus Egységek (IU) száma. A toxoid egy antigén egységét Limes flocculationis-nak nevezik (Lf - pelyhesedési küszöb); ez az a toxoid mennyiség, amely teljesen az antitoxin egy antitoxikus egységéhez kötődik.

A toxoidok antigén tulajdonságait a kötőegységek is jelzik. Az EC meghatározásához a teszt toxoid készítmény, standard antitoxikus szérum (1 ml-ben 0,1 NE tartalommal), kísérleti adag toxin (0,1 NE standard szérumra titrálva) és fehér egerek szükségesek.

A kötési reakciót a következőképpen hajtjuk végre: azonos térfogatú standard antitoxikus szérummal rendelkező kémcsövek sorozatába adjuk a teszt toxoid különböző hígításait. A kötőkeveréket 45 percig termosztátban tartjuk, majd minden kémcsőbe egy kísérleti adag toxint adunk, és ismét termosztátban hagyjuk 45 percig. Ezt követően az egyes csövekből származó keveréket (szérum + anatoxin + toxin) 2-4 egérbe fecskendezzük, és állapotukat 4 napon keresztül figyeljük. Ha a szérumhoz hozzáadott összes toxoidot megköti, akkor a toxin hozzáadása, majd a keverék egereknek történő beadása az egerek halálához vezet. Ha nincs elég toxoid az egész szérum megkötéséhez, a hozzáadott toxint a szérum semlegesíti, és az egerek nem pusztulnak el.

A toxoidokat a toxinfertőzések (diftéria, gázgangréna, botulizmus, tetanusz és egyes staphylococcusok által okozott betegségek) megelőzésére, illetve ritkábban kezelésére használják. A toxoidok egyedi készítményként és a kapcsolódó vakcinák részeként kaphatók, számos betegség elleni immunizálásra.

Bármely fertőzés elleni immunizálásra szánt készítményeket ún egyszeri vakcinák, két fertőző betegség ellen - divakcinák, három ellen - trivakcinák, számos fertőzés ellen - polivakcinák. A kapcsolódó vakcinák különféle baktériumok és toxoidok antigénjeinek keverékét tartalmazó készítmények. A kapcsolódó vakcinák, például a DTP vagy a TABte használata lehetővé teszi számos fertőzés elleni immunitás kialakítását és az oltások számának csökkentését.

A többértékű vakcinákat általában olyan gyógyszereknek nevezik, amelyek egy fertőzés több fajtáját vagy szerológiai típusát tartalmazzák (például influenzaellenes, leptospirózis stb.).

Az anatoxin (toxoid) biológiai eredetű aktív gyógyszer, amelyet bakteriális toxinok semlegesítésével nyernek t ° 39-40 ° -os expozícióval (Ramon módszere) vagy más módszerekkel. Az anatoxin az eredeti toxin specifikus antigén és immunogén tulajdonságaival rendelkezik, és újakat szerez - ártalmatlanság, stabilitás. A toxoid legfontosabb tulajdonsága az immunogenitás, vagyis az a képesség, hogy immunitást indukáljon emberben. A legmagasabb immunogenitás tetanuszban, diftériában, botulinum toxoidban.

Az anatoxin (Anatoxinum; görögül ana - ellen + toxin; a toxoid szinonimája) egy toxin ártalmatlan származéka, amely formalin és hő hatására teljesen elvesztette az eredeti toxin toxikus tulajdonságait, és megőrizte antigén és immunogén hatását. tulajdonságait.

A toxoid teljesen ártalmatlan, visszafordíthatatlan (semmilyen kémiai vagy fizikai hatás nem tudja visszaadni a gyógyszer eredeti toxicitását). Az anatoxin nagyon ellenálló (tűri az ismételt fagyasztást és felengedést, jól ellenáll magas hőmérsékletű), és nagyon stabil a hosszú távú tárolás során. A toxoid antigén tulajdonságait (vagyis az aktív immunizálásra való alkalmasságát) a flokkulációs reakció (lásd) és a pelyhesítő (antigén) egységek (Lf) tartalma határozza meg 1 ml gyógyszerben. A hatásosságot (például diftéria toxoid) számos állatkísérlet és immunitási vizsgálat igazolta gyermekek és felnőttek körében, akiket ezzel a gyógyszerrel immunizáltak diftéria ellen.

Anyanyelvi diftéria toxoid 1 ml-ben legalább 20 Lf-t kell tartalmaznia. Jelenleg a diftéria elleni aktív immunizáláshoz a natív diftéria toxoid helyett tisztított szorbeált diftéria toxoidot használnak. A diftéria toxoid személynek történő bejuttatását a legtöbb esetben nem kísérik nemkívánatos reakciók az oltásra. Minél fiatalabb a beoltott, annál ritkábban fordul elő "oltási reakció" (24-48 órán belül), amely a t ° 38,5 ° -ra történő növekedésében és a rossz egészségi állapotban fejeződik ki. A diftéria toxoid alkalmazása diftéria elleni aktív immunizálásra jelentősen csökkentette az előfordulást. Megállapították a tetanusz elleni aktív immunizálás hatékonyságát tetanusz toxoiddal, és igazolták előnyét a tetanusz szeroprofilaxissal szemben.

A bakteriális toxinokra bizonyos koncentrációjú formalinnal hatva, és a toxint t° 37-40°-on tartva a teljes semlegesítéshez és a toxin anatoxinná való átalakulásához szükséges ideig, lehetőség nyílt a toxinok teljes semlegesítéséhez és anatoxinná való átalakulásához szükséges gyógyszerek előállításához. specifikus megelőzésés számos fertőzés kezelése. Ezek a staphylococcus, a botulinum, a vérhas, a gáz gangréna kórokozói által termelt toxinokból származó toxoidok, egyes mérgező kígyók mérgéből származó toxoidok, az abrinból származó toxoidok.

Jelenleg a toxoidokat ballasztfehérjéből és más nitrogéntartalmú anyagokból tisztítják, és a specifikus antigéneket kisebb térfogatokban koncentrálják. A toxoidok kezelésének leggyakoribb módszerei a natív toxoidok kicsapása. semleges sók (ammónium-szulfát), nehézfémsók, savakkal (sósav, triklór-ecetsav, metafoszforsav) történő kicsapás az izoelektromos ponton, valamint etanollal és metanollal történő kicsapás alacsony hőmérsékleten stb. Ennek eredményeként lehetőség van gyógyszerek beszerzésére. amelyek antigén- és immunogén tulajdonságaikban jelentősen felülmúlják az eredeti natív toxoidokat. Számos kapcsolódó tisztított, alumínium-hidroxidon szorbeált koncentrált toxoidot kaptak, amelyeket több fertőzés elleni egyidejű immunizálásra használnak: kapcsolódó diftéria-tetanusz toxoid diftéria és tetanusz elleni aktív immunizáláshoz, diftéria-tetanusz-pertussis vakcina ezen fertőzések elleni egyidejű aktív immunizáláshoz. A szorbeált diftéria-tetanusz toxoiddal végzett immunizálást kétszer szubkután, 0,5 ml-es dózisban, 30-45 napos időközzel végezzük, elsődleges újraimmunizálással, amelyet 0,5 ml gyógyszer beoltásával végeznek 6-9 hónap elteltével. A gyermekek ezt követő reimmunizálását 0,5 ml gyógyszeradaggal végezzük. Lásd még Toxins.

toxoid

Anatoxin (anatoxin)

toxoid (a görög ana- - hát és toxikón - méreg szóból), egy toxin ártalmatlan származéka (lásd Toxins), amely megőrizte antigén és immunogén tulajdonságait. Az A.-t a toxin formalinnal történő semlegesítésével nyerik 37-40 °C-on. Humán immunizálásra alkalmas A.-t először 1923-ban szerzett G. Ramon francia immunológus. A tetanusz és diftéria betegségek megelőzésére a tetanuszt és a diftéria A-t alkalmazzák. Staphylococcus A., Botulinum A., Dysentery A., A. gáz gangréna kórokozói által termelt toxinokból, A. egyes mérgező kígyók mérgéből Az A.-t lovak immunizálására is használják, hogy terápiás antitoxikus szérumot nyerjenek belőlük (tetanusz elleni, diftériaellenes). Lásd még: Immunity.

T. I. Bulatova.

Nagy szovjet enciklopédia. - M.: Szovjet Enciklopédia. 1969-1978 .

Nézze meg, mi az "Anatoxin" más szótárakban:

- (a görög ana back és toxin szóból) speciális kezeléssel semlegesített, de antigén tulajdonságokat megőrző bakteriális toxinok (lásd Antigének). Diftéria, tetanusz és egyéb fertőzések elleni immunizálásra használják... Nagy enciklopédikus szótár

- (toxoid) toxinból előállított gyógyszer, amely nem rendelkezik kifejezett toxikus tulajdonságokkal, ugyanakkor képes az eredeti toxin elleni antitestek termelését indukálni. Általában a toxin inaktiválódik a ... ... Wikipédia hosszan tartó expozíciójával

Egy betegséget okozó szervezet speciálisan feldolgozott toxinja, amely elvesztette mérgező tulajdonságait, de megtartja azt a képességét, hogy serkenti az antitestek képződését a szervezetben. Az A.-t emberek és állatok aktív immunizálására használják (például védőoltások ... ... Mikrobiológiai szótár

Létezik., szinonimák száma: 2 toxin (57) toxoid (2) ASIS szinonim szótár. V.N. Trishin. 2013... Szinonima szótár

toxoid- Megváltozott bakteriális toxin, nem mérgező, de immunogén Biotechnológiai témák HU toxoid … Műszaki fordítói kézikönyv

Anatoxin- (toxoid) (a görög ana hát és toxikón méreg szóból) ártalmatlan toxinszármazék, amely megőrizte antigén és immunogén tulajdonságait. A toxin 37-40 °C-on formalinnal történő semlegesítésével nyertük. Humán immunizálásra alkalmas toxoidot először szereztek... Fizikai antropológia. Illusztrált magyarázó szótár.

- (a görög ana back és toxin szóból), speciális kezeléssel semlegesített, de antigén tulajdonságokat megőrző bakteriális toxinok (lásd Antigének). Diftéria, tetanusz és más fertőzések elleni immunizálásra használják. * * * ANATOXIN…… enciklopédikus szótár

- (gr. ana-szerű) toxin, amely megfelelő feldolgozással mentes a toxikus tulajdonságoktól, de megtartja az antitestek képződését okozó képességét, immunitást alkalmazva. védőoltásokhoz, például diftéria, tetanusz ellen. Új szótár idegen szavak. készítette: EdwART… Orosz nyelv idegen szavak szótára

- (ana + toxin, syn. toxoid) bakteriális exotoxin, amely a hosszan tartó formalin expozíció következtében elvesztette toxicitását, de megőrizte antigén tulajdonságait; aktív immunizálásra használják... Nagy orvosi szótár

Bakteriális exotoxin, amely elvesztette toxicitását a hosszan tartó formalin expozíció következtében, de megőrizte antigén tulajdonságait.

ANATOXINOK (anatoxin; Görög ana- - ellen + toxinok) - olyan bakteriális toxinok, amelyek speciális kezelés hatására elvesztették mérgező tulajdonságaikat, de megtartották antigén és immunogén tulajdonságaikat. Általában a méreganyagok semlegesítése formalin és hő (35-38 °) hatására történik. A toxinemiás fertőzések kórokozói - diftéria, tetanusz, gázgangréna, botulizmus és mások - nagyon erős, antigén tulajdonságokkal rendelkező exotoxinokat termelnek.

1909-ben E. Löwenstein véletlenül felfedezte a tetanusztoxin toxicitásának gyors csökkenését a ultraibolya sugarakés formalin. Később Eisler (M. Eisler, 1912) és Levenshtein azt találta, hogy miután 0,1-0,3% formalint adtak a tetanusztoxinhoz és a emelkedett hőmérséklet a toxint méregtelenítik. Egy ilyen toxin bevezetése immunitást vált ki az állatokban.

Tíz évvel később G. Ramon kidolgozott egy módszert a humán immunizálásra alkalmas toxoidok előállítására, amelyről 1923. december 10-én beszámolt a Francia Tudományos Akadémiának. Ramon azt találta, hogy amikor formalint és hőt alkalmaznak a diftériatoxinra, semlegesített vegyület keletkezik, amely antigén és immunogén tulajdonságokkal rendelkezik. A diftéria toxin és az antitoxin flokkulációjának reakcióját tanulmányozva formalint használt antiszeptikumként a toxin konzerválására. A formalin hozzáadása a toxinhoz nem akadályozta meg a pelyhesedés jelenségét (lásd), még akkor sem, ha ezt a toxint termosztátban mérsékelt hőnek tették ki. Anélkül, hogy befolyásolná a toxin flokkulációs képességét, a formalin jelentősen csökkentette toxikus tulajdonságait, mint számos más vegyi és fizikai tulajdonságok. A toxinok flokkulációjának reakciója antitoxinokkal nagy szerepet játszott a toxoidok előállítására szolgáló módszer kidolgozásában. Ezzel a reakcióval könnyen ellenőrizhetővé vált a változás antigén tulajdonságok toxoidok a toxinok formalinnal történő semlegesítésének folyamatában. A reakció alkalmazása előtt nem lehetett megállapítani, hogy a toxin megtartja-e az antigén tulajdonságait, ha a toxigén tulajdonságok elvesznek.

Egyes toxoidok allergének lehetnek, és általános és helyi reakciók, nem kapcsolódik specifikus toxicitáshoz. Az anatoxinokra a stabilitás és az irreverzibilitás jellemző: a különböző hőmérsékleteken történő hosszú távú tárolás során megőrzik ártalmatlanságukat és antigén tulajdonságaikat. A toxoidok antigén tulajdonságait az antitoxinok kötődési reakciója (lásd), amelyet kötési egységekben (EU) fejeznek ki, vagy az antitoxinokkal való flokkulációs reakció határozza meg. A toxoidok immunogén tulajdonságait állatok immunizálása határozza meg. tengerimalacok, egerek) és immunizáló egységekben (IU) fejezzük ki, vagyis bizonyos mennyiségű toxoid azon képességében, hogy megvédje az állatokat a megfelelő toxinok bejuttatásától.

A terület által kidolgozott toxoidok előállításának alapelvei képezték a toxoidok előállításának alapját a világ számos részén. Ez lehetővé tette a diftéria és tetanusz elleni tömeges immunizálás megkezdését, ami e fertőzések előfordulási gyakoriságának meredek csökkenéséhez vezetett.

A formalin méregtelenítésének folyamatát a toxin aktív centrumának szerkezetének visszafordíthatatlan károsodásának tekintik a toxint alkotó funkciós csoportok formalinnal való reakciója miatt. Az első szakaszokban a méregtelenítés nagyon gyorsan lezajlik (általában a formalinnal való inkubáció 1-4. napján a toxicitás 80-90%-os csökkenése figyelhető meg, és a teljes ártalmatlanság csak 2-4 hét múlva érhető el, ill. több. Ahhoz, hogy a semlegesítés után ártalmatlan és stabil toxoidokat kapjunk, bizonyos időnek kell eltelnie a toxoidok „éréséhez”. A bakteriális toxinok semlegesítése antigén tulajdonságaik megsértése nélkül semleges környezetben történik. A savas környezet megakadályozza a formalin kölcsönhatását a toxin aminocsoportjaival, lelassítja vagy teljesen leállítja a semlegesítési folyamatot. Ha a toxinok formalizálása lúgos közegben történik, akkor a toxin gyorsan, de antigén tulajdonságainak jelentős elvesztésével válik ártalmatlanná. A formalin optimális mennyisége az összes méregtelenítéshez 0,3-0,8% ajánlott; ezen a mennyiségen belül egyes toxinokhoz frakcionált módszerrel formalint kell hozzáadni, ez hozzájárul a toxin gyorsabb semlegesítéséhez az antigén tulajdonságok ERŐS elvesztése nélkül. A méreganyag semlegesítésére nagyon fontos a hőmérséklet, amelyen a toxin található. A hőmérséklet emelkedése az összes toxin gyorsabb méregtelenítéséhez vezet, az antigén tulajdonságok jelentős elvesztésével. A bakteriális toxinok semlegesítésének gyorsított módszerének kifejlesztésére tett kísérletek 1% vagy több formalin hozzáadásával t ° 36-40 ° -on 6-8 napos inkubáció után a toxicitás elvesztéséhez vezettek, az antigén tulajdonságok meredek csökkenésével. A méregtelenítés során a formalin mennyiségének növelése azért sem indokolt, mert a bevitt formalin mennyiségétől függetlenül annak csak egy része lép kölcsönhatásba a méreggel. A megkötött formalin mennyisége függ a táptalaj összetételétől, amelyen a toxint előállítják, az amin nitrogén tartalmától, kémiai összetétel toxin.

Különböző koncentrációjú ammónium-szulfáttal végzett frakcionált kicsapást alkalmaztak a toxoidok ballasztfehérjékből való tisztítására. Jelenleg ezt a módszert csak a tisztítás és a kis mennyiségű toxoid koncentrációjának bizonyos szakaszaiban alkalmazzák.

Külföldi országokban a diftéria és tetanusz toxoid tisztítására és koncentrálására a 8%-os parlodin membránnal bevont vese alakú szűrőkön keresztül történő ultraszűrés módszerét alkalmazzák. A vízben való feloldás után a csapadékot ammónium-szulfáttal frakcionáljuk különböző telítési százalékoknál. A tisztított diftéria toxoid 1 mg össznitrogénenként 1800-2500 Lf-t tartalmaz (Lf - angolul rövidítés, flokkuláció határa - flokkulációs küszöb).

A Szovjetunióban a savas kicsapást a botulinum toxoidok, a gázgangréna kórokozói, valamint a diftéria és tetanusz toxoidok tisztítására és koncentrálására használják. Savanyítás előtt az oldat ionerősségének növelésére 10-30%-os nátrium-kloridot oldunk a toxoidokba. Ezután csökkentse a toxoidok pH-ját 3,5-re HCl hozzáadásával; a csapadékot elválasztjuk a folyadéktól, és az eredeti toxoid térfogatának 1/20-ában feloldjuk az izotóniás nátrium-klorid oldatban. A kapott toxoidkoncentrátumot további tisztításnak vetjük alá acetonos újrakicsapással. A tetanusz és más toxoidok savas kicsapása során egyes laboratóriumok hexametofoszfátot használnak a toxoidoldat ionerősségének növelésére. A bakteriális toxinok és anatoxinok alumínium-foszfáttal, alumínium-oxid-hidráttal, kalcium-foszfáttal és más szervetlen szorbensekkel történő szorpcióval tisztíthatók, majd ezt követően eluálják (lásd); ráadásul egyre többet széles körű alkalmazás találja meg az ioncserélő kromatográfiás és gélszűrési módszereket különböző márkájú sephadexeken keresztül (lásd Gélszűrés, Kromatográfia).

A toxinemiás fertőzések elleni immunizáláshoz alumínium-oxid-hidrátra és alumínium-foszfátra lerakódott toxoidokat használnak; alumínium-kálium timsó lerakásra csak az állatorvosi gyakorlatban használatos. A lerakódott toxoidok magas immunogenitása a szorbens adjuváns hatásával és az antigéndepóból való késleltetett reszorpciójával magyarázható. Ennek eredményeként kis mennyiségű toxoid hosszú távú bevitele következik be a szervezetbe, ami az immunitás feszültségének kialakulásához vezet. Az alumínium-hidroxidon szorbeált diftéria és tetanusz toxoidok alkalmazása a Szovjetunióban élő emberek tömeges immunizálására éles visszaesés diftéria és tetanusz előfordulása.

A gyermekek diftéria, tetanusz és szamárköhögés elleni immunizálását egy kapcsolódó vakcinával végzik, beleértve a szorbeált diftéria-, tetanusz-toxoidokat és a corpuscularis pertussis vakcinát.

Bibliográfia: Apanaschenko N. I., Pomyankevich A. N. és Nekhotenova E. I. Tisztított adszorbeált diftéria toxoid, Zhurn. mikr., epid. iimmun., 8. szám, p. 54, 1951: Vorobjov A. A., Vasziljev N. N. és Kravcsenko A. T. Anatoxins, M., 1965, bibliogr.; Vygodchikov GV. Staphylococcus betegségek mikrobiológiája és immunológiája, M., 1950, bibliogr.; ő, Staphylococcus fertőzések, M., 1963, bibliográfia; Matveev K. I. Botulizmus, M., 1959, bibliogr.; ő, A tetanusz epidemiológiája és megelőzése, M., 1960, bibliogr.; Ramon G. Negyven év kutatómunka, per. franciából, Moszkva, 1962; Prévot A. R. Manuel de classification et de determination des bacteries anaerobies, P., 1957.

K. I. MATVEEV