Analýza rýb na rakovinu prsníka. Analýza rýb na rakovinu prsníka Ochranné reakčné zóny rýb

Metóda farbenia FISH (fluorescenčná in situ hybridizácia) bola vyvinutá v Livermore National Laboratory (USA) v roku 1986. nová metódaštúdium chromozómov - metóda fluorescenčnej detekcie DNA in situ hybridizáciou so špecifickými molekulárnymi sondami. Metóda je založená na schopnosti chromozomálnej DNA viazať sa za určitých podmienok na fragmenty DNA (sondy DNA), ktoré zahŕňajú nukleotidové sekvencie komplementárne k chromozomálnej DNA. DNA sondy sú vopred označené špeciálnymi látkami (napríklad biotínom alebo digoxigenínom). Značené DNA sondy sa aplikujú na cytogenetické prípravky pripravené na hybridizáciu metafázové chromozómy. Po hybridizácii sa prípravky ošetria špeciálnymi fluorescenčnými farbivami konjugovanými s látkami, ktoré sa môžu selektívne naviazať na biotín alebo digoxigenín. Každý chromozóm má špecifickú farbu. Hybridizácia sa môže uskutočniť aj s rádioaktívne značenými sondami. Cytogenetická analýza sa uskutočňuje pod fluorescenčným mikroskopom pod ultrafialovým svetlom.

Metóda FISH sa používa na detekciu malých delécií a translokácií. Chromozomálne výmeny (translokácie a dicentriky) medzi rôznofarebnými chromozómami sa dajú ľahko definovať ako viacfarebné štruktúry.

Koniec práce -

Táto téma patrí do sekcie:

Tréningový modul. Bunková biológia

Vyššie odborné vzdelanie.. Baškirský štát lekárska univerzita.. Ministerstvo zdravotníctva a sociálneho rozvoja..

Ak potrebujete ďalší materiál k tejto téme, alebo ste nenašli to, čo ste hľadali, odporúčame použiť vyhľadávanie v našej databáze diel:

Čo urobíme s prijatým materiálom:

Ak bol tento materiál pre vás užitočný, môžete si ho uložiť na svoju stránku v sociálnych sieťach:

Všetky témy v tejto sekcii:

Tréningový modul. Základy všeobecnej a lekárskej genetiky
(usmernenia pre študentov) Akademická disciplína Biológia Pre smer prípravy Všeobecného lekárstva Co.

Pravidlá pre ukončenie laboratórnych prác
Nevyhnutným prvkom mikroskopického štúdia objektu je jeho načrtnutie do albumu. Účelom skice je lepšie pochopiť a v pamäti upevniť štruktúru objektu, tvar jednotlivých štruktúr

Praktická práca
1. Príprava dočasného prípravku „Cibuľové filmové bunky“ Na prípravu dočasného prípravku s cibuľovým filmom odstráňte

Štruktúra cytoplazmatických membrán. Transportná funkcia membrán
2. Učebné ciele: Poznať: - štruktúru univerzál biologická membrána- vzory pasívneho transportu látok cez membrány

Štruktúra eukaryotických buniek. Cytoplazma a jej zložky
2. Cieľ predmetu: Poznať: - znaky organizácie eukaryotických buniek - štruktúru a funkciu cytoplazmatických organel.

Organely zapojené do syntézy látok
V každej bunke dochádza k syntéze látok pre ňu charakteristických, ktoré sú buď stavebný materiál pre novovzniknuté štruktúry, ktoré nahradia opotrebované, alebo s enzýmami zapojenými do biochemických reakcií

Organely s ochrannými a tráviacimi funkciami
Lyzozómy Tieto organely sú známe už od 50. rokov 20. storočia, kedy belgický biochemik de Duve objavil v pečeňových bunkách malé granuly obsahujúce hydrolytické látky.

Organely podieľajúce sa na dodávke energie do bunky
Prevažná väčšina funkcií buniek zahŕňa výdaj energie. Živá bunka tvorí ho v dôsledku neustále prebiehajúcich redoxných procesov, konštitu

Organely zapojené do delenia a pohybu buniek
Patrí medzi ne bunkové centrum a jeho deriváty – mihalnice a bičíky. Bunkové centrum Bunkové centrum sa nachádza v živočíšnych bunkách a v niektorých

Praktická práca č.1
1. Mikroskopická analýza permanentného preparátu „Golgiho komplex v bunkách spinálneho ganglia“ O preparáte nervové bunky ich

Ribozómy
Detekujú sa pomocou elektrónovej mikroskopie v bunkách všetkých pro- a eukaryotických organizmov, ich veľkosť je 8-35 nm, priliehajú k vonkajšej membráne endoplazmatického retikula. Na ribozómoch sa vykonáva s

Granulárne endoplazmatické retikulum
Zvážte submikroskopickú štruktúru hrubého endoplazmatického retikula na elektrónovej mikrofotografii. Identifikujú sa tri oblasti acinárnych buniek pankreasu z netopiera nalačno. Predtým

Cytoplazmatické mikrotubuly
Cytoplazmatické trubice sa nachádzajú v bunkách všetkých živočíšnych a rastlinných organizmov. Sú to valcovité, vláknité útvary dlhé 20-30 mikrónov, 1

Mitotická aktivita v tkanivách a bunkách
V súčasnosti sa študovali mitotické cykly a spôsob mitotickej aktivity mnohých živočíšnych a rastlinných tkanív. Ukázalo sa, že každé tkanivo má určitú úroveň mitotickej aktivity. Oh m

Mitóza (nepriame delenie) v bunkách koreňov cibule
Pomocou mikroskopu s malým zväčšením nájdite reprodukčnú zónu špičky cibule, umiestnite do stredu zorného poľa oblasť s jasne viditeľnými aktívne sa deliacimi bunkami. Potom nastavte prípravok na vysoký výkon

Amitóza (priame delenie) v pečeňových bunkách myší
Preskúmajte bunky pečene myší pri veľkom zväčšení pod mikroskopom. V prípravku majú bunky mnohostranný tvar. V nedeliacich sa bunkách je jadro okrúhle s jadierkom. Pri delení buniek, ktoré začali

Synkaryonová vaječná bunka škrkavky
Pomocou mikroskopu s malým zväčšením nájdite časť maternice škrkavky naplnenú folikulmi obsahujúcimi vajíčka. Preskúmajte preparát pri veľkom zväčšení. Cytoplazma vo vajíčkach sa zmenšuje a odlupuje

Štruktúra a funkcie DNA a RNA. Génová štruktúra a regulácia génovej expresie v pro- a eukaryotoch. Etapy biosyntézy bielkovín
2. Učebné ciele: Vedieť: - chemické zloženie a vlastnosti organizácie nukleových kyselín; - rozdiely medzi DNA a RNA;

Vzorce dedičnosti znakov pri monohybridných kríženiach. Typy interakcie alelických génov
2. Výchovno-vzdelávacie ciele: Poznať: - vzorce monohybridného kríženia; - I a II Mendelove zákony; - typy interakcie

Zákon nezávislého dedenia vlastností. Typy interakcie nealelických génov
2. Výchovno-vzdelávacie ciele: Poznať: - zákonitosti di- a polyhybridného kríženia; - Mendelov zákon III; - typy interakcie

Variabilita ako vlastnosť živých vecí, jej forma. Fenotypová (modifikujúca alebo nededičná) variabilita. Genotypová variabilita
2. Učebné ciele: Poznať: - hlavné formy variability; - získať predstavy o prenikavosti a výraznosti uznania

Samostatná práca žiakov pod dohľadom učiteľa
Praktická práca Stanovenie miery variability znaku a variačného koeficientu v závislosti od podmienok prostredia.

Rozbor rodokmeňa
Nie všetky genetické metódy sú použiteľné na analýzu dedičnosti určitých vlastností u ľudí. Štúdiom fenotypov niekoľkých generácií príbuzných je však možné určiť povahu dedičnosti

Dvojitá metóda na štúdium ľudskej genetiky
Dvojitá metóda nám umožňuje posúdiť relatívnu úlohu genetických a environmentálnych faktorov pri vývoji konkrétneho znaku alebo choroby. Dvojčatá môžu byť jednovaječné (identické) alebo dizygotné (jedno identické).

Dermatoglyfická metóda na štúdium ľudskej genetiky
Dermatoglyfická analýza je štúdium papilárnych vzorov prstov, dlaní a chodidiel. Tieto oblasti kože majú veľké dermálne papily a epidermis, ktorá ich pokrýva, tvorí g

Cytogenetická metóda v štúdiu ľudskej genetiky
Medzi mnohými metódami štúdia dedičnej patológie človeka zaujíma významné miesto cytogenetická metóda. Pomocou cytogenetickej metódy je možné analyzovať materiálny základ dedičnosti

Štúdium sady chromozómov
Môže sa uskutočniť dvoma spôsobmi: 1) priama metóda - štúdium metafázových chromozómov v deliacich sa bunkách, napríklad v kostnej dreni (pomocou

Praktická práca
1. Prehliadka demonštračného prípravku „Human Karyotype“ v cytogenetickom laboratóriu Pri zväčšení X90 sú v zornom poli viditeľné leukocyty

Analýza karyotypu u pacientov s chromozomálnymi ochoreniami (z fotografií)
č.1. trizómia na 13. chromozóme (Patauov syndróm). Karyotyp 47, +13. č.2. trizómia na 18. chromozóme (Edwardsov syndróm). Karyotyp 47, +18. č. 3. trizómia 21 (Downova choroba).

Vykonávanie analýzy odtlačkov prstov
Na vytvorenie vlastných odtlačkov prstov potrebujete nasledovné vybavenie: fotografický valček, sklo s plochou 20x20 cm2, kúsok penovej gumy, tlačiarenskú farbu (alebo podobne

Cytogenetická analýza karyotypu (založená na mikrofotografiách metafázových platničiek)
1. Nakreslite metafázovú platňu. 2. Spočítajte celkový počet chromozómov. 3. Identifikujte chromozómy skupín A (3 páry veľkých metacentrických chromozómov), B (dva páry veľkých

Expresná metóda na štúdium X-sex chromatínu v jadrách epitelu ústnej sliznice
Pred vykonaním škrabania je pacient požiadaný, aby zubami uhryzol sliznicu tváre a vnútorný povrch Utrite si líca gázovou handričkou. Tento postup je potrebný na odstránenie zničených buniek, napr

Populačná štatistická metóda
Populácia je súbor jedincov toho istého druhu, ktorí dlhodobo obývajú jedno územie, relatívne izolovaní od ostatných skupín jedincov tohto druhu, voľne sa krížia a produkujú

Biochemická metóda
Biochemické metódy sú založené na štúdiu aktivity enzýmových systémov (buď aktivitou samotného enzýmu, alebo množstvom konečné produkty reakcia katalyzovaná týmto enzýmom). Biochemikálie

Molekulárna genetická metóda
Všetky molekulárne genetické metódy sú založené na štúdiu štruktúry DNA. Etapy analýzy DNA: 1. Izolácia DNA z buniek obsahujúcich jadrá (krv

Polymerázová reťazová reakcia syntézy DNA
Polymerázová reťazová reakcia (PCR) je metóda amplifikácie (reprodukcie) DNA in vitro, pomocou ktorej môžete v priebehu niekoľkých hodín identifikovať a reprodukovať požadovaný fragment DNA s veľkosťou od 80

č. Celé meno Genotyp Ivanov AA Petrov Aa

Pozorovaný genotyp a frekvencie alel
Genotypy, alely Počet prípadov Frekvencia (vo frakciách) AA 1 / 5 = 0,2 Aa

Pozorované a očakávané frekvencie genotypov a alel
Pozorovaný počet prípadov Pozorovaná frekvencia Očakávaná frekvencia AA (p2)

Pozorovaný genotyp a frekvencie alel
Nie. Schopnosť zrolovať jazyk do skúmavky Genotypy Môžem (áno) A_

Rakovina prsníka (BC) je bežným typom onkológie a, žiaľ, zatiaľ nebola vyvinutá jediná liečebná metóda, ktorá by poskytovala úplnú záruku vyliečenia. Najlepším riešením pre pacientku je preto prevencia a včasná diagnostika rakoviny prsníka. Analýza rýb na rakovinu prsníka je najviac moderná metóda výskum, ktorý vám umožní nasmerovať liečbu pacienta tou najsprávnejšou cestou.

Napriek rozsiahlym skúsenostiam so štúdiom a liečbou tohto ochorenia medicína stále nedokáže indikovať vonkajšie faktory, čo spôsobuje zhubný nádor mliečna žľaza. Žiadny zo známych karcinogénov nemožno spoľahlivo spájať s výskytom tohto ochorenia. Moderné metódy diagnostika vo všeobecnosti poskytuje dobré výsledky a umožňuje s vysokou presnosťou určiť prítomnosť alebo neprítomnosť choroby a štádium vývoja. Nie všetky však poskytujú komplexné informácie, ktoré vám umožňujú presne predpísať liečbu.

Kompletný krvný obraz – kontroluje hladinu bielych krviniek, rýchlosť sedimentácie erytrocytov a hemoglobínu. Prvé dva ukazovatele sa v onkológii zvyšujú, posledný, naopak, klesá. Táto analýza nám však umožňuje posúdiť iba prítomnosť určitých problémov v tele. Dajte presná diagnóza"rakovina mliečna žľaza"Nemôžete to použiť, najmä v ranom štádiu vývoja nádoru.
Biochémia – určuje hladinu enzýmov a elektrolytov, čo nám umožňuje posúdiť prítomnosť metastáz. Tieto údaje však nie sú vždy objektívne. Táto štúdia tiež ukazuje prítomnosť určitých nádorových markerov v krvi, ktoré pomáhajú sledovať prítomnosť rakovinový nádor a jeho umiestnenie.
Spektrálna analýza vám umožňuje určiť prítomnosť rakoviny s pravdepodobnosťou vyššou ako 90%, a to aj v počiatočnom štádiu. Metóda je založená na štúdiu krvi pod infračerveným žiarením, čo vám umožňuje určiť jej molekulárne zloženie.
Biopsia – vykonáva sa odberom vzorky tkaniva z prsníka a ďalším cytologickým rozborom, ktorý určí prítomnosť rakovinových buniek a ich počet, ktorý závisí od stupňa rozvoja ochorenia.
Genetické vyšetrenie zisťuje náchylnosť pacientky na vznik rakoviny prsníka. Vykonáva sa detekciou určitých génov v krvi, ktoré sú zodpovedné za prenos rakoviny z generácie na generáciu.

Najnovšie však a efektívna metóda Dnešným výskumom je takzvaný FISH (fish) test. Skratka preložená z angličtiny znie ako „intracelulárna fluorescenčná hybridizácia“.

Phish testovanie je relatívne nová metóda – používa sa od roku 1980. Napriek zložitosti a vysokej cene sa však podarilo zarobiť pozitívne recenzie od lekárov aj pacientov, ktorí sa vďaka nemu úspešne zbavili rakoviny.

Pre rast buniek prsníka v Ľudské telo Gén nazývaný HER2 reaguje. Názov preložený z angličtiny znamená Human Estrogen Receptor – 2. Normálne receptory tohto génu produkujú HER2, proteín, ktorý reguluje delenie buniek žliaz. Rakovinový nádor (zvyčajne karcinóm) pri svojom vzniku tento gén „oklame“ a prinúti ho narásť ďalšie tkanivo, ktoré nádor využije na svoj vývoj. Táto anomália sa vyskytuje približne v 30 % prípadov a je charakterizovaná pojmom „amplifikácia“.

Týmto spôsobom samotné telo pacienta pomáha rozvoju rakoviny. Ak sa tento proces nezastaví, potom ani tie najmodernejšie a najsilnejšie liečebné metódy nemusia pacientovi pomôcť.

Testovanie amplifikácie génu HER2 sa zvyčajne vykonáva v dvoch fázach:

IHC (imunohistochemický test);
priama FISH analýza (fluorescenčná hybridizácia).

V lokálnej anestézii pacient absolvuje biopsiu – odoberú sa vzorky tkaniva, ktoré sa posielajú do špecializovaného laboratória.

Prvým krokom je zvyčajne imunohistochémia, mikroskopická analýza vzorky rakovinového tkaniva. Určuje základnú prítomnosť génu HER2 v nádorovom tkanive. Táto štúdia je oveľa lacnejšia ako test na rybách a je tiež jednoduchšia a rýchlejšia na vykonanie. Neposkytuje však také presné informácie. Výsledok sa určuje v číslach od nuly do troch bodov. Ak je výsledok menší alebo rovný jednej, potom gén HER2 v nádore chýba a nie je potrebný daľší výskum Nie Od dvoch do troch bodov - hraničný stav, nad tri - je malígny útvar v procese rastu a je potrebné prejsť do druhého štádia diagnostiky.

Rybí test na rakovinu prsníka sa vykonáva nasledovne: do krvi sa zavádzajú prvky molekúl DNA (deoxyribonukleová kyselina) označené špeciálnym farbivom. Tieto markery sú vložené do molekúl DNA pacienta a určujú, či a na akej úrovni dochádza k amplifikácii HER2. Analýza sa vykonáva v reálnom čase, lekár porovnáva rýchlosť delenia génu v mieste podozrivého nádoru s rýchlosťou delenia normálnej oblasti prsníka.

V prípade rakoviny prsníka môže testovanie FISH poskytnúť nasledujúce výsledky:

reakcia je pozitívna - rýchlosť delenia génu HER2 v nádorovom tkanive je dvakrát vyššia ako normálne alebo vyššia, v tomto prípade je potrebná dodatočná terapia;
reakcia je negatívna - HER2 sa nezúčastňuje procesu delenia rakovinových buniek a ak je stále prítomný nádor, tento gén nebude katalyzovať jeho vývoj.

Analýza teda umožňuje určiť abnormálne správanie génu HER2 a upraviť liečbu pomocou paralelnej terapie zameranej na potlačenie tohto génu. V súčasnosti sa na to používa liek Herceptin.

Ak nevykonáte test rýb včas alebo nevenujete pozornosť jeho výsledkom, lekár nebude mať údaje o správaní HER2. V tomto prípade bude liečba predpísaná bez zohľadnenia možnej agresívnej aktivity tohto génu. S najväčšou pravdepodobnosťou takáto terapia neprinesie výsledky - nádor sa bude naďalej agresívne rozvíjať.

Okrem toho, čo bolo opísané vyššie, sledovanie správania génu HER2 dáva onkológom pochopenie stupňa agresivity nádoru a schopnosť predpovedať rýchlosť jeho rastu a šírenia. To zohráva veľmi dôležitú úlohu pri navrhovaní liečby pacienta. Určuje, či je potrebné dohodnúť si stretnutie ťažká liečba(napríklad ožarovanie alebo chemoterapia), alebo by stačila hormonálna liečba, má to zmysel? chirurgická intervencia alebo je to voliteľné.

Výhody a nevýhody analýzy rýb

Ako každá iná diagnostická metóda, aj výskum FISH má pozitívne a negatívne stránky.

Napriek určitému skepticizmu, ktorý môže byť spojený s novosťou tejto techniky, má však nepopierateľné výhody:

Štúdia sa vykonáva rýchlo - výsledok je pripravený v priebehu niekoľkých dní, zatiaľ čo iné diagnostické metódy trvajú až niekoľko týždňov. Tento bod je mimoriadne dôležitý v boji proti rakovine.
Okrem štúdia rakoviny prsníka vám analýza umožňuje zistiť predispozíciu konkrétneho pacienta na onkológiu akéhokoľvek orgánu brušná dutina. Pacientovi je poskytnutá podrobná správa, na základe ktorej môže absolvovať ďalšie vyšetrenia, aby sa predišlo možnému vzniku rakoviny.
Vzhľadom na špecifiká analýzy rýb ju možno použiť na detekciu najmenších genetických abnormalít, ktoré nie je možné diagnostikovať inými metódami.
Na rozdiel od niektorých iných typov testov je test na ryby pre pacienta bezpečný. Okrem biopsie nevyžaduje žiadne ďalšie traumatické účinky.

Niektorí onkológovia považujú účinnosť testu na rybách za kontroverznú. Opierajú sa o štúdie, ktoré neodhalili výraznú výhodu tejto metódy oproti lacnejšej štúdii IHC.

Nevýhody testu rýb zahŕňajú aj tieto faktory:

vysoké náklady na výskum;
vzhľadom na skutočnosť, že markery zavedené do DNA sú trochu špecifické, nemôžu byť použité na niektorých častiach chromozómov;
analýza neodhalí všetky genetické poškodenia, čo môže viesť k diagnostickým chybám.

Vo všeobecnosti, napriek kritike, je analýza rýb najrýchlejšou a najpresnejšou metódou diagnostiky karcinómu prsníka. Je tiež dôležité, že umožňuje predpovedať vývoj niektorých iných typov onkológie.

Akákoľvek rakovina sa lieči najľahšie skoré štádia rozvoj. Bohužiaľ, ironicky, väčšina známych typov malígnych nádorov je v počiatočných štádiách mimoriadne náročná na diagnostiku. Mnohé z používaných diagnostických metód sú navyše časovo náročné a neposkytujú úplne objektívny obraz. Analýza rýb nielenže poskytuje najpresnejší obraz o stave nádoru, ale tiež umožňuje chrániť pacienta pred formami liečby, ktoré sú pre telo deštruktívne (napríklad chemoterapia), pretože stupeň agresivity nádoru je a podľa toho aj pravdepodobnosť metastáz.

Rakovinu prsníka netreba podceňovať. Môže postihnúť úplne každého – mladých aj starých, ženy aj mužov. Extrémna zložitosť liečby, vysoká úmrtnosť a rastúca dynamika chorobnosti sú dôvodom zvýšenej pozornosti medicíny tomuto problému.

K dnešnému dňu neexistuje žiadna liečebná metóda, ktorá by 100% zaručila pozitívny výsledok ochorenia. Existujúce metódy sú náročné na prácu, drahé a môžu spôsobiť veľké vedľajšie škody na tele.

Toto je jedna z tých chorôb, o ktorých to môžeme povedať najlepšia liečba– to je vylúčenie rizikových faktorov a včasná diagnostika.

Predispozícia k rakovine prsníka

Napriek tomu, že rakovina bola prvýkrát popísaná už v 15. storočí pred Kristom a vedci majú obrovské množstvo informácií, stále to nestačí úplný popis etiológie rakoviny prsníka.

Environmentálne faktory ovplyvňujúce výskyt alebo rozvoj rakoviny neboli zistené dostatočne spoľahlivo. Jednotlivé štúdie poukazujúce na konkrétny karcinogén nie sú plne uznávané celou lekárskou komunitou. Existuje však určitá korelácia medzi rakovinou prsníka a nasledujúcim:

Jedným z najdôležitejších faktorov uvedených vyššie je vek: v priebehu rokov sa pravdepodobnosť vzniku rakoviny prsníka rádovo zvyšuje. Vo všeobecnosti je zložitosť problematiky etiológie rakoviny prsníka spôsobená jej genetickou podstatou. Nie je známe, prečo náhle dôjde k poruche a prsné tkanivo sa začne nekontrolovateľne deliť, čo ovplyvňuje susedné tkanivá a vedie k metastázam v celom tele.

Vedci sa však zhodujú na jednom: moderný život oveľa náchylnejší na rakovinu ako predtým.

Preto sú indikované veľké dávky elektromagnetická radiácia, zlé prostredie, znížený obsah kyslík v mestách, fyzická nečinnosť, stres a pod.. Nemožno nebrať do úvahy výrazne zvýšený vek života, pretože rakovina je ochorenie, ktoré zvyčajne prichádza v dospelosti.

Potrebné testy

Možnosť pozitívneho výsledku rakoviny priamo súvisí s načasovaním začiatku liečby, takže postoj k diagnóze by mal byť najzávažnejší.

Vyžadujú sa tieto diagnostické metódy:

mesačná samokontrola (palpačný test);
kontrola u lekára raz za štvrťrok;
Ultrazvuk každých šesť mesiacov;
MRI ročne.

mamografia ( röntgenové vyšetrenie) sa neodporúča pred dosiahnutím veku 30 rokov, pretože vystaveniu žiareniu je najlepšie sa vyhnúť v mladom veku. Ak máte podozrenie na rakovinu prsníka, budete musieť podstúpiť nasledujúce testy:

Metóda výskumu RYBY

FISH štúdia (FISH analýza) je cytogenetická metóda používaná na štúdium membránového proteínu HER2 (Human Estrogen Receptor2). Pri vykonávaní štúdie FISH sa používajú DNA sondy označené fluorescenčným farbivom. Tieto sondy sú vložené do požadovaných oblastí DNA a sú schopné kvantifikovať stupeň amplifikácie HER2. Keďže štúdia prebieha v priebehu času a gény sa naďalej delia, je možné odhadnúť pomer počtu kópií génu HER2 k počtu kópií normálne sa deliacej oblasti. Ak je väčšia alebo rovná 2, výsledok sa považuje za pozitívny HER2.

Analýza FISH hrá zásadnú úlohu v prognóze rakoviny a výbere princípov liečby. Amplifikácia alebo zvýšená aktivita tohto proteínu sa teda vyskytuje v 30 % prípadov rakoviny a vyžaduje špeciálne liečebné metódy zamerané na inhibíciu jeho funkcie. Za normálnych podmienok HER2 kontroluje bunkový rast, delenie a samoopravu. V prípade rakoviny produkuje tento proteín príliš veľa membránových receptorov a dáva bunkám pokyn, aby sa nekontrolovane delili. Takto sa bunka mení na rakovinu.

o pozitívny výsledok FISH test predpisuje liečbu zameranú na potlačenie HER2. Hlavným liekom je dnes Herceptin. Ak sa tento test nevykoná alebo jeho výsledky budú ignorované, výber liečebnej metódy bude nesprávny a rakovina postúpi do terminálne štádium. Navyše, takáto rakovina je vo vývoji agresívnejšia ako HER2-negatívna rakovina.

Imunohistochemická analýza sa uskutočňuje spolu s analýzou FISH. Toto je tiež génová metóda na štúdium proteínu HER2, ale v prípade imunohistochemickej analýzy sa množstvo proteínu HER2 nezisťuje v bunke, ale v špecifickej vzorke.

Od metódy rýb sa líši v nákladoch, ale výstup poskytuje menej informatívne výsledky, ktoré závisia od výskumníka, laboratória a použitých kritérií. Množstvo HER2 proteínu je určené farbou testovanej vzorky a je hodnotené na stupnici od nuly do troch. Spoločne sú tieto dve metódy zlatým štandardom na štúdium stavu HER2 pacienta.

Rakovina prsníka je teda napriek svojmu obrazu celkom liečiteľná úspešná liečba. Onkológovia majú vo svojom arzenáli všetky pokrokové výdobytky medicíny. Všetky tieto prostriedky sú celkom dostupné pre najbežnejšieho občana.

Hlavnou vecou úspešného výsledku choroby je včasné testovanie na rakovinu prsníka, výber správna metóda liečbu a jej skoršie začatie. Nezúfajte, ak nie sú žiadne výsledky, pretože pozitívne emocionálne pozadie má tiež významný vplyv na priebeh ochorenia.

Technika FISH - Fluorescent in situ hybridization bola vyvinutá v polovici 80. rokov 20. storočia a používa sa na detekciu prítomnosti alebo neprítomnosti špecifických sekvencií DNA na chromozómoch, ako aj alfa satelitnej DNA umiestnenej na centromére chromozómu 6, CEP6(6p11). 1-q11.

To prinieslo významný rozdiel v diagnostike. onkologické ochorenia melanocytová genéza nastala v súvislosti s objavom nádorových antigénov. Na malígnom pozadí sa určí mutácia troch antigénov: CDK2NA (9p21), CDK4 (12q14) a CMM1(1p). V tomto smere možnosť objektívneho odlišná diagnóza, na základe stanovenia genetických charakteristík melanocytárnych kožných nádorov, má veľký význam V skorá diagnóza melanóm a jeho prekurzory V jadre s normálnou sadou študovaných génov a chromozómom 6 sú pozorované dva gény RREB1 sfarbené červenou farbou, dva gény MYB sfarbené žltou farbou, dva gény CCND1 zvýraznené. zelená a dve centroméry chromozómu 6, označené Modrá. Na diagnostické účely sa používajú fluorescenčné testy.

Vyhodnotenie výsledkov reakcie: spočíta sa množstvo červených, žltých, zelených a modrých signálov v 30 jadrách každej vzorky, identifikujú sa štyri parametre rôzne možnosti genetické poruchy, pri ktorých je vzorka geneticky v súlade s melanómom. Napríklad vzorka je v súlade s melanómom, ak je priemerný počet génu CCND1 na jadro ≥2,5. Počet kópií iných génov sa hodnotí rovnakým princípom. Liek sa považuje za FISH pozitívny, ak je splnená aspoň jedna zo štyroch podmienok. Vzorky, v ktorých sú všetky štyri parametre pod hraničnými hodnotami, sa považujú za FISH negatívne.

Stanovenie špecifických sekvencií DNA na chromozómoch sa uskutočňuje na rezoch biopsií alebo chirurgického materiálu. V praktickej realizácii vyzerá FISH reakcia takto: skúmaný materiál obsahujúci DNA v jadrách melanocytov je spracovaný tak, aby čiastočne zničil svoju molekulu, aby sa rozbila dvojvláknová štruktúra a tým sa uľahčil prístup k požadovanej oblasti gén. Vzorky sú klasifikované podľa toho, kde sú pripojené k molekule DNA. Materiál pre reakciu FISH v klinickej praxi Používajú sa parafínové rezy tkaniva, nátery a odtlačky.

Reakcia FISH vám umožňuje odhaliť zmeny, ktoré sa vyskytli v molekule DNA v dôsledku zvýšenia počtu kópií génu, straty génu, zmien v počte chromozómov a kvalitatívnych zmien - pohyb génových lokusov oboch v rovnakom chromozómu a medzi dvoma chromozómami.

Na spracovanie údajov získaných pri použití reakcie FISH a štúdium vzťahu medzi počtom kópií génov troch študijných skupín sa používa Spearmanov korelačný koeficient.

Melanóm je charakterizovaný zvýšením počtu kópií v porovnaní s nevusom a dysplastickým nevusom.

Jednoduchý nevus má v porovnaní s dysplastickým nevusom menej abnormalít v počte kópií (t. j. normálnejší počet kópií).

Na zostavenie rozhodovacích pravidiel, ktoré umožňujú predpovedať, či vzorka patrí do jednej alebo druhej triedy (diferenciálna diagnostika jednoduchých a dysplastických névov), sa používa matematický aparát „rozhodovacích stromov“. Tento prístup sa v praxi dobre osvedčil a výsledky použitia tejto metódy (na rozdiel od mnohých iných metód, napr. neurónových sietí) možno jednoznačne interpretovať na konštrukciu rozhodovacích pravidiel na rozlíšenie jednoduchých, dysplastických névov a melanómov. Počiatočné údaje vo všetkých prípadoch boli počty kópií štyroch génov.

Úloha konštrukcie rozhodovacieho pravidla pre diferenciálnu diagnostiku je rozdelená do niekoľkých etáp. V prvej fáze sa rozlišuje melanóm a nevus, pričom sa nezohľadňuje typ nevusu. V ďalšej fáze sa vytvorí rozhodovacie pravidlo na oddelenie jednoduchých a dysplastických névov. Nakoniec, v poslednej fáze, je možné zostaviť „rozhodovací strom“ na určenie stupňa dysplázie dysplastického névu.

Toto rozdelenie úlohy klasifikácie névov do podúloh umožňuje dosiahnuť vysoká presnosť predpovede v každej fáze. Vstupnými údajmi pre konštrukciu „rozhodovacieho stromu“ sú údaje o počte kópií štyroch génov pre pacientov s diagnózou melanóm a pacientov s diagnózou nemelanóm (pacienti s rôzne druhy névus - jednoduchý a dysplastický). Pre každého pacienta sú údaje o počte kópií génu pre 30 buniek.

Rozdelenie problému predikcie diagnózy do viacerých etáp teda umožňuje zostaviť vysoko presné rozhodovacie pravidlá nielen na rozlíšenie melanómu a névov, ale aj na určenie typu névov a predpovedanie stupňa dysplázie pre dysplastický névus. Skonštruované „rozhodovacie stromy“ predstavujú vizuálny spôsob predpovedania diagnózy na základe informácií o počte kópií génu a možno ich ľahko použiť v klinickej praxi na rozlíšenie benígnych, premalígnych a malígnych melanocytových novotvarov kože. Navrhovaná doplnková metóda diferenciálnej diagnostiky je dôležitá najmä pri excízii obrovských vrodených pigmentových névov a dysplastických névov u pacientov detstva, pretože pri návšteve zdravotníckych zariadení takýchto pacientov sa pozoruje vysoké percento diagnostických chýb. Výsledky použitia opísanej metódy sú vysoko efektívne, je vhodné ju použiť pri diagnostike pigmentových kožných nádorov najmä u pacientov so syndrómom FAMM.